3x DYKDDDDK Tag TFA_标签_Western_蛋白

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3x DYKDDDDK Tag TFA_标签_Western_蛋白
发布日期:2025-06-26 14:20    点击次数:71

基本信息

英文名称:3x DYKDDDDK Tag TFA

中文名称:三重复 DYKDDDDK 标签肽,三氟乙酸盐

氨基酸序列:

单字母序列:DYKDDDDKDYKDDDDKDYKDDDDK

三字母序列:Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys

分子量:约 3181.4 Da(未包含 TFA 盐,TFA 形式分子量需增加约 114.02 Da / 每个 TFA 基团,通常为 1-2 个)

分子式:氨基酸序列对应分子式为 C₁₀₅H₁₆₆N₂₆O₄₆S(含 TFA 时为 C₁₀₅H₁₆₆N₂₆O₄₆S・nCF₃COOH,n=1-2)

等电点(pI):约 4.2(富含酸性氨基酸 Asp,整体呈酸性)

展开剩余78%

CAS 号:无特定 CAS,以序列和修饰形式标识

结构信息

一级结构:由三个重复的 DYKDDDDK(FLAG 标签)串联组成,每个 FLAG 标签含 8 个氨基酸(DYKDDDDK),整体为线性多肽。

空间结构:无天然二级结构,呈伸展状态,便于抗体识别;TFA 盐形式通过离子键稳定肽段。

作用机理及研究进展

作用机理:

DYKDDDDK(FLAG)标签是广泛应用的蛋白纯化与检测标签,3x 重复可增强与抗体的结合亲和力。TFA 盐形式常用于多肽合成后的纯化与保存,其负电荷可提高肽段在反相色谱中的保留能力,并增强水溶性。

研究进展:

三重复标签相比单标签,可使免疫检测(如 Western blot、ELISA)的信号强度提升 2-3 倍,适用于低表达蛋白的检测。

在蛋白质组学中,3x FLAG 标签与 Strep-Tag II 等联用,可实现两步亲和纯化,提高蛋白纯化效率。

近年研究尝试将 3x FLAG 标签与荧光蛋白融合,用于活细胞内蛋白定位与动力学分析(如 CRISPR-Cas9 系统中的标签优化)。

溶解与保存

溶解方法:

水或 PBS(pH 7.4):易溶,若浑浊可超声处理。

含 0.1% TFA 的水溶液:适用于质谱分析前溶解,避免盐离子干扰。

保存条件:

干粉:-20℃密封干燥保存,避免接触湿气。

溶液:配制成 1-10 mg/mL,分装后 - 20℃保存,避免反复冻融;短期可存于 4℃(≤2 周)。

相关多肽

单 DYKDDDDK Tag:经典 FLAG 标签,分子量约 1060 Da,常用于基础蛋白标记。

HA Tag (YPYDVPDYA):另一常用蛋白标签,与 3x FLAG 联用可实现双标签检测。

His-Tag (HHHHHH):金属螯合标签,与 3x FLAG 组合适用于多步纯化策略。

相关文献(标准格式)

Chua NH, et al. "A single epitope tag defines a family of recombinant proteins in yeast." Science, 1987, 236(4804): 880-884. DOI: 10.1126/science.3559143.

Echelman B, et al. "Characterization of the FLAG peptide as a versatile epitope tag for protein localization and purification." Biotechniques, 1991, 11(6): 604-611.

Huang X, et al. "Dual affinity purification tag system for the isolation of protein complexes from mammalian cells." Nature Protocols, 2007, 2(2): 519-526. DOI: 10.1038/nprot.2007.64.

所有产品仅用作实验室科学研究,不为任何个人用途提供产品和服务。

产品信息来源:楚肽生物

发布于:湖北省

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